摘要 [目的]比较不同炮制方法对栀子中绿原酸含量影响结论]该方法简便、准确，重现性良好，可用于控制栀子不同炮制品的质量。
关键词栀子（FRUCTUS GARDENIAE）；炮制；绿原酸；HPLC
中图分类号S567文献标识码A文章编号0517-6611（2014）02-00390-02
Abstract [Objective] To compare the effects of different processing methods on the chlorogenic acid content in FRUCTUS GARDENIAE. [Method] The chromatographic separation was conducted on a Inersil ODS[Result] The linearity of chlorogenic acid was in the range of 0.42-2.52 μg/μl with a correlation coefficient over 0.999 9 （n= 6）. The recovery rate of chlorogenic acid is 100.83%. [Conclusion] The method is convenient，rapid and accurate，and can thus be used to quantify in different samples of FRUCTUS GARDENIAE.
Key words FRUCTUS GARDENIAE； Processed； Chlorogenic acid； HPLC
栀子（FRUCTUS GARDENIAE）为茜草科（Rubiaceae）植物栀子（Gardenia jasminoides Eills）的干燥成熟果实，具有泻火除烦、清热利尿和凉血解毒之功效，可用于治疗热病心烦、黄疸尿赤、血淋涩痛和目赤肿痛等[1]。栀子为临床常用药，常用有炒黄、炒焦、炒炭几种炮制品[2]。据文献报道，栀子主要含有环烯醚萜苷、有机酸和色素3类有效成分，其中绿原酸为有机酸主要成分之一[3-4]。现代药理试验证明，绿原酸具有抗肝损伤[5]、抑菌[6]、抗病毒[7]、利胆[7]和促进胃液分泌[7]等广泛作用。笔者利用HPLC法测定栀子及炮制品中绿原酸的含量，旨在为综合评价和分析栀子及其不同炮制品的质量提供参考依据。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1研究对象。栀子，购自玉林药材市场，经广西中医药大学韦松基教授鉴定为茜草科植物栀子（Gardenia Jasminoides Ellis）的干燥成熟果实。
1.1.2主要仪器。LC1100AT高效液相色谱分析仪，购自安捷伦公司，包括紫外检测器；KQ250B型超声波清洗器，购自昆山市超声仪器有限公司。
1.1.3主要试剂。绿原酸对照品，购自中国药品生物制品检定所，批号：110742200517。甲醇（色谱纯），购自天津四友生物医学技术有限公司，批号：091230102；乙腈（色谱纯），购自Fisher lawn，批号：08412；娃哈哈纯净水，其他试剂均为分析纯，市售。
2结果与分析
2.1方法学考察 （1）系统适应性试验。图1表明，在相同的时间上，各供试品溶液和对照品溶液在对应的位置有相同的吸收峰，且绿原酸得到较好的分离，相邻峰间分离度均大于1.5，计算理论塔板数不低于10 000，表明系统适应性良好。（2）线性关系的考察。3）精密度试验。计算得峰面积的RSD为1.94%，表明该仪器精密度良好。（4）重复性试验。计算得峰面积的RSD为1.59%，表明该方法重复性良好。（5）稳定性试验。计算得峰面积的RSD为1.70%，表明样品溶液在12 h内稳定。（6）加样回收率试验。由表1可知，平均回收率为100.83%，RSD为1.30%，表明该方法简便、准确，重现性良好，可用于控制栀子不同炮制品的质量。注：A为绿原酸对照品；B为生栀子；C为炒黄品；D为炒焦品（轻）；E为炒焦品；F为炒焦品（重）；G为炒炭品；1为绿原酸。
3结论与讨论
试验采用HPLC 法对中等大小的生栀子（个药）及不同炮制程度的栀子样品进行了比较研究，测定有机酸类成分绿原酸含量。结果表明，试验各样品中绿原酸含量较学者报道的高[8]，究其原因可能是试验所用栀子药材产自广西，质量较优，这也再次证明广西山栀子的道地性及优越性。对结果进一步分析发现，栀子经炮制后绿原酸含量均降低，且随着炒制时间的延长与炒制程度的加重，绿原酸含量降低越明显。栀子经炮制后，绿原酸含量与生品比较，炒炭品下降最多（31.1%），其次分别是炒焦品（重，21.85%）、炒黄品（11.30%）、炒焦品（9.93%），而炒焦（轻）下降最少（8.61%）。生品中绿原酸含量最高，可能由于生品未经加热处理，避免了绿原酸的损失；而各炒制品中以炒焦（轻，1.38%）含量略高于炒焦（1.36%），可能是炒焦品炒制时间相对较短，减少了样品中含绿原酸的损失；炒黄品低于炒焦品，可能是由于炒黄炒制温度较低，其样品中含水量较高，从而导致其含量降低；其次是炒焦品（重，1.18%）；炒炭品含量最低，可能与绿原酸熔点较低、受热不稳定理化性质有关。由此可见，加热炮制对绿原酸含量有明显影响。临床应用时因根据需要选用适当的炮制品。
试验对无水甲醇、纯化水、浓度0.1%磷酸等不同流动相组成体系进行比较，结果或是出现基线漂移或是色谱峰拖尾等现象，分离效果均不好。故试验采用乙腈-浓度0.1%冰醋酸（12∶88，V/V）为流动相，可使绿原酸在较短时间内（约 14.1 min）出峰，而且峰分离良好、基线平稳。该方法分离效能高、重现性好、结果准确、可靠，可有效地控制栀子药材及其饮片的质量。研究结果为合理规范炮制工艺参数、优化饮片炮制工艺、探讨栀子的炮制意义及制定质量标准提供了参考。
参考文献
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[2] 龚千锋.中药炮制学[M].北京：中国中医药出版社，2008：111.
[3] 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志[M]. 北京：科学出版社，1990.
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[5] 史秀玲，高银辉.绿原酸对小鼠急性肝损伤的保护作用[J].中国实验方剂学杂志，2011，17（19）：199-202.
[6] 张泽生，乌兰.金银花中绿原酸的体外抑菌和抗氧化性的研究[J].天津科技大学学报，2005，20（2）：5-8，34.
[7] 邓良，袁华，喻宗沉.绿原酸的研究进展[J]. 化学与生物工程，2005，22（7）：4-6.
[8] 黎潭辉，罗淑芳，庄义修. HP LC法测定江西栀子中绿原酸的含量[J]. 中医临床研究，2012，4（7）：50-51.
