摘要 对生产和流通领域果蔬农药残留快速检测中常见的缺陷进行探析，提出克服和弥补检测缺陷的方法，以期与从事农残分析的同行交流经验，共同提高业务水平，为现代农业服务。
关键词 果蔬；农药残留；快速检测；缺陷；弥补方法；生产和流通
中图分类号 S481.8 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）03-0321-01
近年来，水果、蔬菜中农药残留（毒）超标现象已成为影响农产品质量安全的关键因素之一，引起了新闻媒体、公众和政府的高度关注。蔬菜农药残留（毒）快速检测作为定性检测技术，因其成本低廉、快速、简单方便，可作为传统仪器分析方法的补充，适用于生产和流通领域品量的检测筛查，普遍应用于蔬菜生产基地、农产品批发市场、超市以及基层农产品质检机构的日常检测。现在以酶抑制率法与分光光度法相结合的速测方法有了迅速的发展和广泛的应用。政府中农业行政主管部门在实现生产和流通领域中农产品质量安全监管的工作过程中，必将涉及对果蔬农残的监控。特别需要指出的是，在使用农残快速检测方法时应注意该方法的缺陷，以减少出现误判和漏检的几率[1-4]。
1 采用农残快速检测法的优势
一是鲜活农产品不宜长时间保存，快速检测方法克服了当前所有准确定量方法（色谱、质谱方法等）检测周期过长的问题。二是我国研究院所和各地市针对特殊样品，采用酶抑制法取得了与准确定量方法（色谱、质谱方法等）一致的结果。三是快速检测方法是经过农业部会同有关部门认定发布的，经法律认可的方法，具有权威性和统一性。四是快速检测方法所需设备简单、易掌握，平时运营成本相对较低。由于质谱仪、色谱仪等检测设备价格昂贵，选用快速检测方法主要是从我国从业人员素质、经济状况的国情出发来考虑的[5-7]。
2 当前农残快速检测法存在的缺陷
“酶抑制率法+分光光度法”已被列为国家标准（GB/T 5009.199—2003）中使用的方法。由于该方法具有成本低廉、快速、简单方便等特点，已成为对果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留（毒）进行现场快速初筛及定性检测的当家技术之一（其他方法还有“速测卡法”等），得到了越来越广泛的使用。需要特别注意的是，由于该速测技术具有较强的针对性，因此对部分果蔬农残的快速检测具有相对的局限性。
2.1 对部分果蔬进行检测可能出现“误检”现象
酶抑制率法对于部分蔬菜的农药残留（毒）测定具有假阳性，国家标准（GB/T5009.199—2003）指出：“葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性”。对产生假阳性的原因进行分析，主要包括以下2方面：一是某些蔬菜中含有对酶有抑制作用的植物次生物质，故而使测定数值偏高，严重时会使酶失去活性，即产生假阳性；二是部分蔬菜汁液多，色素含量高，样品经处理后会使测试溶液含有大量色素，从而在测试时影响到光度计的测定值。
2.2 无法检测到有机磷和氨基甲酸酯类以外类别的农药
由于“酶抑制率法”是针对有机磷和氨基甲酸脂类农药的速测方法，因此不能有效地检出氯丹（chlordane）、百菌清（chlorothalonil）等有机氯类农药和氯氰菊酯（cyperMethrin）、溴氰菊酯（deltamethrin）等菊酯类农药，以及苯胺灵（isopropyl N-phenylcarbamate）、氯苯胺灵[isopropyl N-（3-chlorophenyl）carbamate]、燕麦灵（carbyne）等有机氮类农药。
2.3 因仪器误差、操作方法不当和化学试剂等原因产生的问题
一是同批次样品检测结果重现性不好；二是抑制率偏小；三是抑制率偏大，主要原因是上机前酶就已经开始与底物发生化学反应，致使ΔAs较小；四是农药残留快速检测存在易忽略的事项。
3 克服和弥补检测缺陷的方法
3.1 针对“误检”现象的弥补方法
对于容易产生假阳性的样品，速测时采用“浸泡法”和“冲洗法”：取果蔬的单体，用缓冲液浸泡或反复冲洗单体。尽量减少次生物质和过多的叶绿素对酶产生的干扰。
3.2 针对有机磷和氨基甲酸酯类以外类别农药无法检测的克服方法
针对有机磷和氨基甲酸酯类以外类型农药的检测，建议采取气（液）相法。
3.3 针对因仪器误差、操作方法不当和化学试剂等原因产生问题的弥补方法
严格按照速测操作规程要求，提高检测结果重现性。要保证抽样容器和工具无异味、洁净、干燥，不会对样品造成二次污染，同时制样后及时封存，保护样品待检前的原始性状。取样检测时，要保证一定的样品量，一般取1 g。对同一批次蔬菜抽样要具有代表性和公正性，取样部位要均匀合理，尽量取可食用部分，做到多点混取。同批样品做重现性检测时，定量加液器（移液枪）的加液量一定要保持一致。前处理过程中，制样振荡后要充分静置，提取时避免细小菜沫被吸到比色皿中。
针对抑制率偏小问题的解决措施：一是应尽量保证酶的使用环境温和，试验环境常压、常温、接近中性的酸碱度。酶反应的最适温度是37.5～38.5 ℃。固体粉状的酶应储存在冷冻室内（约-18 ℃），使用时用提取剂溶解；用后的酶液储存在冷藏室（0～5 ℃）内，尽量在7 d内用完。酶液反复解冻最多不能超过2次。二是如果底物与酶反应不完全，应在加底物时用移液枪直接加到比色皿中，避免飞溅，并立即启动速测仪的相关功能键进行比色。
针对抑制率偏大问题的解决措施：样品培养时间要精准掌握，不能超过15 min，从样品培养结束到上机比色速度要快，尽量在1 min之内完成。
3.4 针对速测中易忽略事项的弥补方法
操作人员在试验前应创造适宜的试验环境，并保持电流稳定。在仪器工作之前提前预热5～10 min，使仪器达到稳定的工作状态。一旦开始测量，严禁打开速测仪样品室盖，以免影响测量结果。检测前一定要检查酶液活性（保证3 min前后吸光度的变化值>0.3）。酶液和显色剂不能漏加或多加。拿取比色皿时，避免用手触摸比色皿的光面，放置时保证光面对着速测仪的光路。比色皿中的加液量要达到2/3，但是不能溢出。建议使用同一批次的比色皿，不同批次的比色皿的透光率不同，容易对吸光值产生影响。一批样品尽量同时检测，共用一个对照。
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