关键词 腊样芽孢杆菌 感染 耐药性
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2009.19.202
资料与方法
2006~2008年采集从临床各标本中分离的35株腊样芽孢杆菌,其中血液标本8株,胸腹水标本1株,腹泻粪便或呕吐物12株,伤口拭子3株,眼拭子9株,痰标本2株。每株腊样芽孢杆菌均来自临床不同患者的标本,对同一患者多种标本来源不重复统计。
药敏纸片和培养基:氧氟沙星、红霉素、庆大霉素、青霉素、头孢西丁、呋喃妥因、阿米卡星、利福平、氨苄西林、复方新诺明、头孢唑林、氯霉素、氨苄西林/舒巴坦、药敏纸片(有效期内)。
质控菌株:药敏试验标准菌株为腊样芽孢杆菌ATCC633001,购自中国药品生物制品鉴定所。
菌株鉴定与药敏测试:严格按《全国临床检验操作规程》对送检标本进行分离培养。先取得在血琼脂培养基上生长良好的可疑菌落采用API-50CH试纸条进行鉴定。药敏试验以K-B法测定所有菌株对相应抗菌药物的耐药性,观察时间和结果评价依据NCCIS 2002年版本的标准。
结 果
培养特性:普通肉汤中呈混浊生长,有菌膜。在血琼脂培养基(温度36℃,pH7.4)上生长良好,培养24小时,菌落融合成一片,不透明,灰白色,表面粗糙,边缘不整齐似毛玻璃状、白腊状、呈β溶血。形态及染色:革兰阳性大杆菌,芽孢呈卵圆形,不突出菌体,菌体两端较平整,多数呈链状排列。生化反应:触酶、动力、麦芽糖、N-乙酰葡萄糖胺、核糖、七叶灵、淀粉、果糖、葡萄糖、蔗糖、硝酸盐还原、枸橼酸盐、海藻糖、明胶液化、V-P试验均为阳性,靛基质、H2S、甘露醇、甲基红、尿素酶、肌醇、阿拉伯糖、乳糖、木糖、菊粉、鼠李糖、山梨醇、卫茅醇、测金盏花醇试验均为阴性,符合腊样芽孢杆菌生物学特性。
抗菌药物体外敏感试验:35株腊样芽孢杆菌对13种常见抗菌药物耐药率为:氧氟沙星13.6%、庆大霉素13.6%、阿米卡星11.4%,耐药率均<15%,抗菌活性较好且价格适中,可以考虑为经验用药的首选;青霉素类、头孢菌素类抗菌药物,如头孢西丁(86.3%)、青霉素(81.8%)、氨苄西林(79.5%) 、头孢唑林(79.5%)、呋喃妥因(77.3%)耐药率均达75%以上,不应作为经验用药的选择。抑酶剂添加后,可显著提高抗菌活性,如氨苄西林/舒巴坦的耐药率下降为38.6%。其余抗菌药物耐药率分别为:红霉素43.2%、氯霉素34.1%、利福平63.6%、复方新诺明70.5%。
复合感染例数:2种以上菌同时感染为复合感染。分离到44株腊样芽孢杆菌的临床标本,发生复合感染的有5例(11.4%)。其中合并细菌感染的4例,合并真菌感染1例。
讨 论
腊样芽孢杆菌属于需氧芽孢杆菌属,是一种需氧的能形成芽孢的革兰阳性杆菌。主要通过污染食品引起食物中毒,还可以引起败血症、心内膜炎、创伤和肺部感染等疾病。监测腊样芽孢杆菌的耐药性,对合理使用抗菌药物,减少耐药菌株的产生以及流行病学调查具有重要意义。为此,本人对我院临床标本的腊样芽孢杆菌的分离及耐药状况进行了分析。
使用API-50CH试纸条进行菌株坚定时,尽可能使用该公司生产的8.5g/NaCl配制待测菌悬液,因其离子强度、pH值稳定,以确保坚定结果的准确性。必要时,应用API-20E试纸条中的前11个测定结果和NTT反应结果补充API-50CH试纸条测定结果。
腊样芽孢杆菌的营养要求普通,培养特性的腊状很典型,生化表型也较稳定,使用手工法鉴定并不难。在实际工作中每年都能在多种临床标本中检测到腊样芽孢杆菌,并且纯度很高,但是由于受教科书的影响,认为腊样芽孢杆菌引起的食物中毒才有临床意义,因而在临床标本中捡出时均作为污染菌。