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烤烟叶对鲫鱼的毒性研究

发布时间:2022-11-07 09:55:08 来源:网友投稿

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(\X?Sx!j {r',bxbjsqZnf. !Z+-'-E材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验鱼缸。试验鱼缸6个,规格:长×宽×高为1.2 m×0.6 m×0.7 m。

1.1.2 恒温棒。柏卡乐牌自动恒温棒,额定电压220~240 V,额定频率50~60 Hz,额定功率500 W,用于恒定试验过程中试验水体温度,保证各试验水体水温一致。

1.1.3 增氧设备。松宝SB-988增氧泵,额定电压220~240 V,额定频率50~60 Hz,额定功率12 W,出气量4×4 L/min。使用增氧泵是为了使试验过程中试验水体有充足的溶氧,保证试验鱼不受缺氧干扰意外死亡。

1.1.4 试验水源。试验水源采用饮用自来水。

1.1.5 供试鱼类。品种为2龄鲫鱼,平均尾重(148±5)g;1龄鲫鱼鱼苗,平均尾重(25.3±2.0)g。

1.1.6 供试烤烟叶。试验用烤烟叶为去年收集的当年废弃的等级外烤烟叶,收集后用塑料袋密封保存。

1.1.7 电子天平。称量用电子天平为上海舜宇恒平科学仪器有限公司生产的FB224电子天平,技术参数为Max:220 g、e:1 mg、Min:0.01 g、d:0.1 mg;电源:DC 12 V 1 000 mA;功耗:12 VA。

1.2 试验方法

相同水源水质、相同水温条件下,利用同一品种不同规格、同一规格不同给药方法,在不同浓度梯度下进行试验。

1.2.1 试验水质处理。试验的前1 d把自来水分别注入试验的6个鱼缸,放入恒温棒,把温度调节到22 ℃,同时向每个试验鱼缸中放入2个增氧泵气石,并打开增氧泵,进行曝气,消除自来水中残留的有效氯,每次试验前统一曝气12 h。

1.2.2 烤烟叶给药方法。①浸泡法:在试验前把烤烟叶浸泡在水中一段时间后,过滤除去烤烟叶,用水溶液对148 g 2龄鲫鱼进行毒性试验。浸泡方法是按1∶10的比例浸泡,把500 g烤烟叶放入5 000 g的水中浸泡24 h,过滤后及时使用。试验设计浓度为120、126、131、136、141、146 g/m3。②挂袋法:把烤烟叶装入袋子中,直接放入试验鱼缸,对148 g 2龄鲫鱼和25.3 g 1龄鲫鱼进行毒性试验,此种方法简单方便,在生产实践中应用广泛。方法为用40目筛网制作成15 cm×20 cm的袋子,根据梯度浓度计算烤烟叶用量,称量后放入袋子直接放入鱼缸。为保证药袋及时沉入水中,在药袋中放入一小石块。试验设计浓度分别为106、111、116、121、126、131 g/m3和91、96、101、106、111、116 g/m3。

1.2.3 烤烟叶加工。因为每次试验,每一个试验鱼缸使用的烤烟叶数量较小,为了减少烤烟叶质量差异对试验结果的影响,在试验之前把烤烟叶人工切割加工成2 cm×2 cm的烤烟叶碎块,再把加工好的烤烟叶碎块混合搅拌均匀,然后装入大塑料袋密封待用。

1.2.4 增氧。使用雷磁JPB-607A型溶解氧测定仪,定期测定试验水体含氧量并及时增氧,使溶解氧保持在5~6 mg/L之间。

1.2.5 试验实施。①预备试验:从7.5 g/m3开始通过14个梯度找出了鲫鱼出现死亡及全部死亡的浓度范围。②正式试验:根据预备试验结果按相等间距梯度开展烤烟叶对鲫鱼的毒性试验,每个鱼缸水量0.4 m3、鱼数10尾,水温22 ℃,试验观察时间96 h,统计死亡数量,用Bliss法计算LC50值。试验中定期监测水温和溶解氧,使水温保持22 ℃,溶解氧保持在5~6 mg/L之间。

1.3 评价计算方法

1.3.1 半数致死量计算(Bliss法)。试验中半致死量的计算是采用半致死量(LC50)Bliss法的评价与计算[4],通过Bliss法分别计算出烤烟叶对鲫鱼的96 h LC5、96 h LC50、96 h LC95值。

1.3.2 安全浓度计算。安全浓度计算是根据Bliss法得出的烤烟叶对鲫鱼的96 h LC50(半致死浓度),按照安全浓度(satfety concentration,SC)经验公式,即安全浓度(SC)=96 h LC50×0.1,计算出试验烤烟叶对鲫鱼的安全浓度。

2 结果与分析

2.1 规格为148 g 2龄鲫鱼浸泡法试验

采用浸泡法,对平均尾重为148 g的2龄鲫鱼开展烤烟叶浸泡溶液毒性试验,结果见表1。根据浸泡法不同浓度对平均尾重为148 g的2龄鲫鱼进行攻毒试验后得出的死亡情况,按照Bliss法计算96 h LC5、96 h LC50、96 h LC95值,并根据安全浓度经验公式计算安全浓度。

回归方程y(Probit)=-80.025+40.051 log(D)。半数致死量LC50=132.71 g/m3,LC50(Feiller校正)95%的可信限为129.36~136.94 g/m3,LC5=120.74 g/m3,LC95=145.87 g/m3,安全浓度SC=13.3 g/m3。

2.2 规格为148 g 2龄鲫鱼挂袋法试验

采用挂袋法,对平均尾重为148 g的二龄鲫鱼开展烤烟叶浸泡溶液毒性试验,试验结果见表2。根据挂袋法不同浓度对平均尾重为148 g的2龄鲫鱼进行攻毒试验后得出的死亡情况,按照Bliss 法计算96 h LC5、96 h LC50、96 h LC95 值,并根据安全浓度经验公式计算安全浓度。

回归方程y(Probit)=-70.14+36.213 log(D)。半数致死量LC50=118.84 g/m3,LC50(Feiller校正)95%的可信限为115.64~122.11 g/m3,LC5=107.03 g/m3,LC95=131.94 g/m3,安全浓度SC=11.9 g/m3。

2.3 规格为25.3 g 1龄鲫鱼挂袋法试验

采用挂袋法,对平均尾重为25.3g的1龄鲫鱼开展烤烟叶浸泡溶液毒性试验,结果见表3。

回归方程y(Probit)=-64.753+34.566 log(D)。半数致死量LC50=104.23 g/m3,LC50(Feiller校正)95%的可信限为101.21~107.34 g/m3,LC5=93.409 g/m3,LC95=116.3 g/m3,安全浓度SC=10.4 g/m3。

2.4 不同给药方式、不同规格鲫鱼的LC5、LC50、LC95及安全浓度值对比

不同给药方式、不同规格鲫鱼的LC5、LC50、LC95及安全浓度值对比见图1。不同给药方式、不同规格的鲫鱼,其LC5、LC50、LC95各不相同。同一给药方式(挂袋法),鱼体规格越小其耐药性越低,即随着鱼体规格的变小,烤烟叶对鲫鱼的毒性96 h内致死浓度、半致死浓度、全部死亡浓度及安全使用浓度逐步降低;相同鱼体规格浸泡法烤烟叶对鲫鱼的96 h内致死浓度、半致死浓度、全部死亡浓度及烤烟叶安全使用浓度大于挂袋法。

3 结论与讨论

3.1 在稳定的试验环境下,不同规格鲫鱼、不同给药方式的96 h LC50值各不相同

当水温维持在(22.0±0.2)℃,溶解氧為5~6 mg/L时,浸泡法148 g 2龄鲫鱼的96 h LC50为132.71 g/m3,96 h LC5为(下转第226页)

(上接第223页)

120.74 g/m3,96 h LC95为145.87 g/m3;挂袋法148 g 2龄鲫鱼的96 h LC50为118.84 g/m3,96 h LC5为107.03 g/m3,96 h LC95为131.94 g/m3;25.3 g 1龄鲫鱼的96 h LC50为104.23 g/m3, 96 h LC5为93.41 g/m3,96 h LC95为116.3 g/m3。

3.2 小规格鱼体的耐药性低于大规格鱼体

采用相同的给药方法(挂袋法),发现148 g 2龄鲫鱼的96 h LC50值(118.84 g/m3)大于1龄鲫鱼的96 h LC50值(104.23 g/m3),说明小规格鲫鱼对烤烟叶的耐药性低于大规格鲫鱼[5-6]。

3.3 浸泡法96 h LC50值大于挂袋法

相同规格的鲫鱼(148 g 2龄鲫鱼),采用浸泡法其96 h LC50为132.71 g/m3;采用挂袋法,其96 h LC50为118.84 g/m3,浸泡法96 h LC50值大于挂袋法的96 h LC50值。因为浸泡时烤烟叶与水的比例为1∶10,药物有效成分不能全部释放在水中,还有部分残留在烤烟叶中,导致不同给药方式的96 h LC50值不一致。

3.4 不同给药方式、不同规格鲫鱼的安全浓度

水温在(22.0±0.2)℃、溶解氧在5~6 mg/L之间时,浸泡法148 g 2龄鲫鱼的安全浓度为13.3 g/m3;采用挂袋法的148 g 2龄鲫鱼安全浓度为11.9 g/m3,25.3 g 1龄鲫鱼的安全浓度为10.4 g/m3。

4 参考文献

[1] 李时春.烟叶防治鱼病探讨[J].攀枝花学院学报,2004(5):92-95.

[2] 陈修春.烟叶防治鱼病技术[J].现代农业科技,1995(10):22.

[3] 吴意孙.巧用烟叶防治鱼病[J].中国水产,2006(10):55.

[4] 黎七雄,汪辉,肖清秋,等.半数致死量(LD50)Bliss法的评价及计算[J].数理医学杂志,1995(4):318-320.

[5] 吴意孙.巧用烟叶防治鱼病二例[J].福建农业,2008(2):25.

[6] 褚新梅.烟叶在鱼病防治中的应用[J].河北渔业,2006(7):56.

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